膜分離技術(shù),被認為是20世紀(jì)末至21世紀(jì)中期最有發(fā)展前途的高新技術(shù)之一。與其他傳統(tǒng)的分離方法相比,膜分離具有過程簡單、經(jīng)濟性較好、往往沒有相變、分離系數(shù)較大、節(jié)能、高效、無二次污染、可在常溫下連續(xù)操作、可直接放大、可專一配膜等優(yōu)點,隨著膜分離技術(shù)的不斷發(fā)展,濾膜技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、生物技術(shù)、能源工程等領(lǐng)域。
如何選擇膜?
首先考慮膜與試劑的化學(xué)兼容性,是水溶液還是有機試劑。 過濾器裝置必須和樣品的化學(xué)性質(zhì)完全相容。一些過濾膜含有可能對一些應(yīng)用造成干擾的無毒的潤濕劑。另一些濾膜可能結(jié)合蛋白質(zhì)或其它大分子,從而導(dǎo)致過濾器過早堵塞或高價值 樣品的損失。因此,了解樣品性質(zhì)以及濾膜對與之接觸的溶液的潛在影響是非常重要的。
微孔濾膜可以按照材質(zhì)進行分類:
- NYLON:尼龍膜 - 水性生物學(xué)溶液、醇類溶液和非水 HPLC/GC 溶劑,DMSO
- PES: 聚醚砜膜 - 過濾水性溶液,培養(yǎng)基,藥物溶液和混合物
- CA: 醋酸纖維素 - 過濾緩沖液、水性試劑和溶液
- SFCA: 無表面活性劑的醋酸纖維素膜-免疫學(xué)樣品和生物液體
- MCE:混合纖維素 - 在水性溶液或空氣中截留顆粒并捕獲細胞
- PTFE: 聚四氟乙烯 - 去除溶劑和氣體中的顆粒
- PVDF: 液體除菌過濾和生物制品過濾
材料 |
材料特性 |
流速 |
DNA結(jié)合 |
蛋白結(jié)合 |
SFCA |
親水 |
中等到高 |
低 |
低 |
CA |
親水 |
高 |
低 |
低 |
PES |
親水 |
高 |
低 |
低 |
MCE |
親水 |
高 |
非常低 |
非常低 |
NYLON |
親水 |
低到中等 |
低至中 |
非常高 |
PTFE |
疏水 |
高到非常高 |
不適用 |
不適用 |
PVDF |
親水 |
高 |
低 |
低 |
NYLON 尼龍膜
非常適合過濾水性生物學(xué)溶液、醇類溶液和非水 HPLC/GC 溶劑。本質(zhì)上是親 水性的,推薦用于對可提取物含量要求非常低的應(yīng)用,因為它們不含任何潤濕劑、清潔劑或 表面活性劑。尼龍膜的耐化學(xué)性能較強,適于過濾腐蝕性較大的溶液,例如醇類和 DMSO。 但是,和硝酸纖維素膜一樣,尼龍膜結(jié)合蛋白質(zhì)和其它大分子的能力強于醋酸纖維素膜或聚 醚砜膜。耐堿不耐酸。
PES 聚醚砜膜
強烈推薦用于過濾細胞培養(yǎng)基。濾膜具有最低的蛋白結(jié)合能力、超低的浸出物 含量以及高流速,是過濾培養(yǎng)基的首選。PES 膜的流速也高于纖維素或尼龍膜。
CA 醋酸纖維素
最適于過濾緩沖液、水性試劑和溶液,包括 EIA 和 ELISA 樣品。濾膜具有 低蛋白結(jié)合能力及浸出物含量,非常適合過濾緩沖液。
SFCA 無表面活性劑的醋酸纖維素膜
最常用于免疫學(xué)樣品和生物液體。濾膜具有低蛋白結(jié)合 能力、比標(biāo)準(zhǔn) CA 濾膜更低的浸出物含量,可用于過濾細胞培養(yǎng)液體和細胞溶液
MCE 混合纖維素膜
具有高度的非特異性吸附性能,適用于許多常用的實驗室應(yīng)用。親水性, 對稱的結(jié)構(gòu)使其能夠?qū)崿F(xiàn)高流速,還能與水性溶液(pH 4 至 8)、碳氫化合物以及其他幾種 有機溶劑相容
PTFE 聚四氟乙烯膜
本質(zhì)上是疏水性的,適于過濾氣體,包括增濕的空氣。特氟龍膜的耐化 學(xué)性極佳,這使其非常適于過濾其它濾膜不能過濾的溶劑或其它腐蝕性化學(xué)品,是溶劑和腐 蝕性酸堿的理想選擇。由于其疏水性,特氟龍膜在過濾水性溶液以前必須用溶劑(例如乙醇) 預(yù)先潤濕。
PVDF 聚偏二氟乙烯膜
能夠耐受 pH 2-10 的溶液,耐有機溶劑性能較好,具有良好的抗腐蝕、 耐氧化性能和耐熱性能,常用于液體除菌過濾和生物制品過濾。不能耐受丙酮, DMSO, THFDMF,二氯甲烷,氯仿等。
第二步:確定孔徑,你想通過過濾完成什么?
孔徑通常由您的應(yīng)用或使用目的來決定。支原體可以用 0.1μM 孔過濾器去除。大多數(shù)培養(yǎng) 基、緩沖溶液、生物液和氣體的常規(guī)實驗室除菌通常采用 0.2 或 0.22μM 孔過濾器完成。溶 液和溶劑的澄清和預(yù)過濾最好用 0.45μM 或更大孔徑的過濾膜操作。為改進過濾器性能而進 行的預(yù)過濾也可用單獨購買的玻璃纖維預(yù)過濾器完成。
第三步:確定你需要過濾的液體量
- 13mm 過濾 2-10ml
- 25mm 過濾 10-100ml(預(yù)過濾最高可達 200ml)
- 50mm 過濾 0.2-5L
過濾的實際體積際取決于溶液本身以及它堵塞膜的速度。不含大量顆?;虼罅康鞍踪|(zhì)的相對 清澈的溶液會更容易過濾,因此允許更多的體積有效通過膜。另一方面,高顆粒數(shù)的溶液可 能在通過幾毫升后就堵塞了膜。對于細胞培養(yǎng)基,血清或蛋白質(zhì)的數(shù)量會對流速和過濾量產(chǎn) 生影響。過濾器的容量(150、250、500、1000 毫升)是對平均可過濾的液體量的一般指導(dǎo)。 可以通過預(yù)過濾或高速離心來減少顆粒。